英文名稱:Anti-AKAP7?
中文名稱:蛋白激酶A錨定蛋白7抗體(AKAP7)
抗體來(lái)源:兔子
克隆類型:多克隆
交叉反應(yīng):人、小鼠,大鼠?、豬、馬、羊?
產(chǎn)品應(yīng)用:WB=1:500-2000 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 ICC=1:100-500 IF=1:100-500(石蠟切片需做抗原修復(fù))
尚未在其他應(yīng)用程序中測(cè)試。
用戶終應(yīng)確定合適稀釋濃度。
分 子 量:11.3kDa
細(xì)胞定位:細(xì)胞核 細(xì)胞漿 細(xì)胞膜
狀態(tài):凍干或液體
濃度:1mg/ml
來(lái)源于:KLH conjugated synthetic peptide derived from human AKAP7:31-80/104
亞型:IgG
純化方法:affinity purified by Protein A
儲(chǔ)存液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
?別 名:A kinase (PRKA) anchor protein 7; A kinase anchor protein 18 kD; A Kinase Anchor Protein 7; A Kinase Anchor Protein 7 Isoform Alpha; A kinase anchor protein 7 isoform beta; A kinase anchor protein 7 isoform gamma; A kinase anchor protein 7 isoforms alpha and beta; A kinase anchor protein 9 kDa; A Kinase Anchoring Protein 18; A-kinase anchor protein 18 kDa; A-kinase anchor protein 7 isoforms alpha and beta; AKA7A_HUMAN; AKAP 18; AKAP 7; AKAP-7 isoforms alpha and beta; AKAP15; AKAP18; Akap7; HGNC377; OTTHUMP00000040266; Protein kinase A anchoring protein 7; Protein kinase A anchoring protein 7 isoform alpha; Protein kinase A anchoring protein 7 isoform beta; Protein kinase A anchoring protein 7 isoform gamma; Protein kinase A anchoring protein 7 isoforms alpha/beta; Protein kinase A-anchoring protein 7 isoforms alpha/beta.
保存條件:在-20°C下保存一年。避免重復(fù)凍融循環(huán)。凍干抗體在室溫下至少穩(wěn)定一個(gè)月,并在-20°C下保持一年以上。當(dāng)在無(wú)菌pH7.4 0.01M PBS或抗體稀釋劑中重組時(shí),抗體在2-4°C下至少穩(wěn)定兩周。
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產(chǎn)品介紹
激酶(prka)錨定蛋白7;激酶錨定蛋白18kd;激酶錨定蛋白7;激酶錨定蛋白7亞型α;激酶錨定蛋白7亞型β;激酶錨定蛋白7亞型γ;激酶錨定蛋白7亞型α和β;激酶錨定蛋白9kd a;激酶錨定蛋白18;a-激酶錨定蛋白1n 18 kDa;a-激酶錨定蛋白7亞型α和β;aka7a_人;akap18;akap7;akap-7亞型α和β;akap15;akap18;akap7;hgnc377;otthump00000040266;蛋白激酶A錨定蛋白7;蛋白激酶A錨定蛋白7亞型α;蛋白激酶A錨定蛋白7亞型β;蛋白激酶A錨定蛋白In 7亞型γ;蛋白激酶A錨定蛋白7亞型α/β;蛋白激酶A錨定蛋白7亞型α/β。
抗體滴定方法
用同種細(xì)胞,相同細(xì)胞數(shù)量與反應(yīng)體積,加入不同量的抗體計(jì)算陽(yáng)性峰熒光強(qiáng)度及信噪比(S/N>3)。
1、滴定的濃度范圍盡量大,至少5個(gè)左右。
2、滴定實(shí)驗(yàn)條件要和實(shí)際實(shí)驗(yàn)條件*,如反應(yīng)溫度、pH等。
3、弱表達(dá)或不分群的抗原不適合做滴定。
功能:
以cAMP依賴性蛋白激酶(pka)為靶向,并允許與L型鈣通道的功能耦合。
Fc受體是指細(xì)胞表面能夠與免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM、IgE和IgD)結(jié)合的分子,存在于NK 細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞的表面。FcR 能夠與抗體的Fc段結(jié)合,在檢測(cè)時(shí)產(chǎn)生假陽(yáng)性,圖4. 為FcR 封閉前后陽(yáng)性結(jié)果對(duì)比。
Subunit:
結(jié)合cAMP依賴性蛋白激酶(pka)。與PrkA相互作用;只有細(xì)胞質(zhì)形式能夠與PrkA相互作用。
本服務(wù)項(xiàng)目主要是利用流式細(xì)胞儀和熒光標(biāo)記抗體對(duì)客戶提供的細(xì)胞樣品或全血樣品進(jìn)行檢測(cè)分析??蓹z測(cè)的項(xiàng)目有:細(xì)胞周期檢測(cè)、細(xì)胞凋亡檢測(cè)、免疫細(xì)胞分型、細(xì)胞表面抗原鑒定、同城上機(jī)檢測(cè)。
亞細(xì)胞位置:
頂端細(xì)胞膜。主要針對(duì)頂端膜和側(cè)細(xì)胞膜。主要針對(duì)側(cè)膜。
流式細(xì)胞術(shù)(FCM)工作流程中的所有步驟對(duì)獲取可發(fā)表的高品質(zhì)圖像都至關(guān)重要。尤其是利用正確的抗體去識(shí)別抗原以及放大信號(hào)是實(shí)現(xiàn)顯示的關(guān)鍵。
組織特異性:
在腦、心、肺、胰腺和骨骼肌中表達(dá)。
重要注意事項(xiàng):
本產(chǎn)品僅用于研究用途,不用于臨床治療或診斷應(yīng)用。
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組織/細(xì)胞:大鼠腦組織;4%多聚甲醛固定石蠟包埋;
抗原提?。簷幟仕峋彌_液(0.01M,pH 6),15min煮沸,用3%過(guò)氧化氫阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶30min;37℃下阻斷緩沖液(正常山羊血清)20 min;
孵育:抗Akap7多克隆抗體,未結(jié)合 1:200,在4°C下過(guò)夜,然后與二級(jí)抗體 和DAB 結(jié)合。
抗體溶解方法
方法1:我們的抗體(凍干粉)已經(jīng)包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐劑(疊氮鈉或慶大霉素),您只需要加入滅菌的雙蒸水就行了。抗體溶解后,置于-20℃保存,分裝后使用,避免反復(fù)凍融,可保證至少1年有效;
方法2:也可以只加入一半體積的雙蒸水,再用一半體積的甘油補(bǔ)足,置于-20℃保存,這樣抗體不會(huì)凍,有利于抗體的穩(wěn)定。
后續(xù)試驗(yàn)時(shí),再使用對(duì)應(yīng)的緩沖液稀釋成工作液,即用即配。
我們的抗體(凍干粉),在常溫放置下,至少一個(gè)月有效;若在-20℃下保存(推薦),至少三年有效。
抗體修復(fù)方式
修復(fù)液:0.01M 枸櫞酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)
抗體修復(fù)方法:
方法1:沸水浴修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài)15min,自然冷卻至室溫;
方法2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火5min,?;?min,中火5min,自然冷卻至室溫。
抗原修復(fù)(免疫組化石蠟切片)
用于福爾馬林固定的石蠟包埋組織芯片需要抗原修復(fù)。
福爾馬林固定的組織有可能破壞了原來(lái)組織的抗原結(jié)構(gòu),蛋白多肽發(fā)生交聯(lián),導(dǎo)致部分抗原表位封閉,結(jié)合位點(diǎn)減少,所以需要抗原修復(fù),以暴露原來(lái)的抗原表位,達(dá)到充分顯露抗原,以不出現(xiàn)明顯脫片現(xiàn)象為佳。
抗原修復(fù)的幾種常用方法(供參考)
1、 微波爐加熱:
在微波爐里加熱0.01枸櫞酸鈉緩沖液(pH6.0)至沸騰后將組織芯片放入,斷電,間隔5-10分鐘,反復(fù)1-2次。根據(jù)玻片情況可參考采用微波加熱“3-5-3法”3分鐘溫火沸騰后靜止5分鐘,再溫火沸騰3分鐘即可。
適用的抗原:來(lái)源于人、大鼠、小鼠的組織標(biāo)本;來(lái)源于其他動(dòng)物種屬的組織標(biāo)本。
2、 沸熱修復(fù):
電爐或水浴鍋加熱0.01M枸櫞酸鈉緩沖液(pH6.0)至95℃左右,放入組織芯片加熱10-15分鐘。
3、 高壓熱修復(fù):
在沸水中加入EDTA(pH8.0)或0.01m枸櫞酸鈉緩沖溶液(pH6.0).蓋上不銹鋼鍋蓋,但不能鎖定。將玻片置于金屬染色架上,緩慢加壓,使玻片在緩沖液中浸泡五分鐘,然后將蓋子鎖定,小閥門(mén)將會(huì)升起來(lái)。10分鐘后除去熱源,置入涼水中,當(dāng)小閥門(mén)沉下去后打開(kāi)蓋子。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的抗原修復(fù)。(骨及軟骨組織的標(biāo)本選擇較溫和的微波加熱修復(fù)) 。
4、 酶消化方法:
常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前預(yù)熱37℃,消化時(shí)間約為5-30分鐘。
適用于被固定遮蔽的抗原:包括 Collagen.GFAP. Complement.Cytokeratin.c-erB-2.LCA.LN.等。
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