一、原理

　　

　　熒光探針法PCR試劑盒采用的是一種雙探針PCR技術，其原理是在PCR擴增的過程中，加入一種雙標記的熒光探針，這種熒光探針是由一個末端與一個熒光染料分子共價結合，而另一末端與一個熒光熄滅器分子共價結合，探針含有一段特異性序列，可以與PCR引物配對結合。當熒光探針與目標DNA序列匹配時，酶促反應會將其附加的熒光染料分子和熒光熄滅器分子分開，從而讓熒光染料發(fā)光，從而檢測到PCR擴增結果。

　　

　　二、優(yōu)點

　　

　　相比于傳統(tǒng)的基于SYBRGreen的PCR技術，在很多方面都具有很大的優(yōu)勢，包括：

　　

　　1.高靈敏度?？梢詸z測到非常少量的目標序列，可達到10^-6~10^-9，不同于SYBRGreen的非特異性染色，在多種混合樣品中可以精準地檢測出目標序列。

　　

　　2.高特異性?？梢愿鶕?jù)目標DNA序列的特異性進行擴增，避免非特異性擴增的影響，提高檢測的準確性和特異性。

　　

　　3.高可靠性。具有穩(wěn)定的熒光熄滅器和熒光染料，效果可靠，不易失效，同時試劑盒中具有多重內部引物控制，可確保PCR反應全過程的準確性。

　　

　　4.高通量?？梢詫崿F(xiàn)高通量擴增，該技術可以在大量的樣本中同時篩查目標DNA序列的存在，并且可以在同一PCR反應中檢測多個目標序列。

　　

　　三、應用

　　

　　1.生命科學研究?？梢杂糜诨蚍中?、基因表達、蛋白質鑒定、病毒診斷等方面的生命科學研究。

　　

　　2.醫(yī)學診斷?？梢杂糜诙喾N疾病的診斷，如血液病、艾滋病、肺結核、乙肝等重要傳染病的檢測和診斷。

　　

　　3.食品安全檢測?？梢杂糜谑称沸l(wèi)生檢測，檢測食品中的病原菌、霉菌、真菌等，包括食品中的脆弱質量控制測試。

　　

　　4.環(huán)境監(jiān)測。可以用于環(huán)境監(jiān)測，檢測污水中的細菌、腸病毒等目標物質，民生和生態(tài)環(huán)境的廢水管理、排放檢測等。

　　

　　總之，熒光探針法PCR試劑盒是一種比較成熟的PCR技術，其在臨床檢測、基因檢測、病原檢測、DNA定量、定性等方面有著廣泛的應用前景。隨著技術的不斷發(fā)展和完善，其中存在的問題將會逐步得到解決，使熒光探針法PCR技術在更多的領域發(fā)揮其潛力。