動物細胞培養(yǎng)技術是當今生物工程領域中的前沿技術之一,無論是在研究還是在生產(chǎn)實踐方面都對當代生物技術有著重要的影響。近年來隨著臨床需求的增加,單克隆抗體藥物發(fā)展迅速,如何提高哺乳動物細胞生產(chǎn)治療性抗體的產(chǎn)量和質(zhì)量越來越受到重視。
細胞培養(yǎng)基是人工模擬動物細胞的體內(nèi)生長環(huán)境,維持體外細胞存活和增殖的營養(yǎng)物質(zhì)基礎,其主要功能是為細胞提供適宜的pH和滲透壓,以及細胞本身不能合成的各種營養(yǎng)物質(zhì)。
培養(yǎng)基的主要作用是促進和維持細胞的生長發(fā)育,其開發(fā)策略可以分為兩類:自上而下和自下而上。自下而上的策略指的是,對培養(yǎng)基中各種單一營養(yǎng)成分的不同濃度造成其對細胞生長和對產(chǎn)物產(chǎn)生的不同影響進行考察。該策略需要耗費大量的時間進行大量的試驗,進而著重考察的是每一個組分對細胞的影響。而自上而下的策略指的是將培養(yǎng)基分成許多個不同的亞型,針對各個亞型先進行篩選和組合,而后再進行組內(nèi)的優(yōu)化。
細胞培養(yǎng)基必須含有充分的營養(yǎng)物質(zhì),才能滿足新細胞合成、細胞代謝等生化反應所需要的物質(zhì)和能量。其主要成份是水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助營養(yǎng)物質(zhì)等。此外,還可能含有血清、血清替代成分、pH指示劑等。
通常液體細胞培養(yǎng)基避免-20℃凍存,因為解凍時可能會有營養(yǎng)成份析出,影響培養(yǎng)效果。正常情況下于2~8℃避光保存,使用前從冰箱取出,放入室溫進行平衡。通常的液體培養(yǎng)基有效期是6個月到12個月。盡量避免長期貯存,其中的谷氨酰胺會隨著儲存時間的延長而慢慢分解,如果細胞生長不良,可考慮檢測培養(yǎng)基中的谷氨酰胺含量確定是否再補加谷氨酰胺。